方法：DNA片段的制备、载体的选择 、片段与载体连接 。在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法 。
原理：外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸 ，可生成4个新的磷酸二酯链 。
但如果质粒DNA已去磷酸化 ，则吸能形成2个新的磷酸二酯链 。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。
载体DNA的选择
质粒是细菌染色体外遗传因子 ，DNA呈环状 ，大小为1-200千碱基对(kb) 。在细胞中以游离超螺旋状存在，很容易制备 。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态 ，一是“紧密型”；二是“松弛型 ”。此外还应具有分子量小 ，易转化，有一至多个选择标记的特点 。质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段，适用于构建原核生物基因文库 ，cDNA库和次级克隆 。
以上内容参考：百度百科-分子克隆
（1）克隆的过程：先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中 ，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎 ，当胚胎发育到一定程度后 ，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。
（2）世界上第一个克隆出来的是北方豹蛙 。1952年 ，罗伯特·布里格斯和托马斯·J·金成功地克隆了北方豹蛙 。
（3）克隆技术的利：
培育优良畜种和生产实验动物；生产转基因动物；生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；复制濒危的动物物种 ，保存和传播动物物种资源，维持生态平衡。
克隆技术的弊端：
克隆技术导致的基因复制 ，会威胁基因多样性的保持 ，生物的演化将出现一个逆向的颠倒过程，即由复杂走向简单 ，这对生物的生存是极为不利的 。克隆人是对自然生殖的替代和否定 ，打破了生物演进的自律性，带有典型的反自然性质 。
扩展资料：
克隆也可以理解为复制 、拷贝和翻倍（港澳台的意译），就是从原型中产生出同样的复制品 ，它的外表及遗传基因与原型完全相同 ，但大多行为 思想不同。时至今日，“克隆 ”的含义已不仅仅是“无性繁殖” ，凡是来自同一个祖先 ，无性繁殖出的一群个体，也叫“克隆 ” 。
这种以单细胞培养出来的克隆动物 ，具有与单细胞供体完全相同的特征 ，是单细胞供体的“复制品 ” 。由于克隆技术是无性生殖所以它并不是根据基因重组、基因突变 、染色体变异等原理而发明的技术。虽然克隆很神奇，但是它诱人的地方也就是它最危险的地方 。
百度百科-克隆
http://hnzcsy.cn/news-hnzcsy/23.html http://www.gyizix.org.cn/news-ys/125.html https://3g.haoka.bj.cn/yjing/132.html http://tq.gyizix.org.cn/news-ys/79.html http://wap.hnzcsy.cn/news-hnzcsy/63.html https://m.haoka.bj.cn/yjing/7.html http://wap.hnzcsy.cn/news-hnzcsy/55.html http://tq.gyizix.org.cn/news-ys/82.html https://3g.haoka.bj.cn/yjing/168.html https://m.haoka.bj.cn/yjing/102.html